NEFA Assay Kit er et verktøy for kvantifisering av NEFA

NEFA analysesett er et verktøy for kvantifisering av NEFA (nitrogenoksid). Den brukes til å bestemme konsentrasjonen av NEFA i blod- eller vevsprøver. NEFA er et viktig næringsstoff som er ansvarlig for regulering av energimetabolisme, hjerteeksitabilitet, nevromuskulær ledning, blodtrykk og blodpropp. Det finnes hovedsakelig i bein, muskler, bløtvev og røde blodlegemer.

Forberedelse

NEFA er et lite, 50,2 kDa protein som har evnen til å binde seg til DNA. Det er et cytosolisk type I fettsyresyntase (FAS) kompleks som produserer ikke-esterifisert palmitinsyre. I nærvær av Acyl-CoA-oksidase (ACS), oksiderer FAS-komplekset 3-metyl-N-etyl-N-(b-hydroksyetyl)-anilin til 4-aminoantipyrin, som er den molekylære forløperen for acetyl-CoA. Denne prosessen er en avgjørende enzymatisk prosess for alle eukaryote organismer.

Selv om NEFA kanskje ikke har den heftige massen til et fett, er det en viktig drivstoffkilde for perifert vev. Det metaboliseres av leveren og transporteres kompleksbundet med albumin til perifert vev. NEFA frigjøres også av et tioesterase (TE) domene i FAS-komplekset.

Pipettering

ELISA-sett brukes til å oppdage små kjemiske forbindelser, proteiner og peptider. Disse settene er basert på rekombinante proteiner uttrykt i E.coli. Settene inneholder ikke azid, timerosal og andre naturressurser.

I settet er det reagenser som BSA, pyrogenfri fortynningsbuffer og vaskeløsning. Vaskeløsningen er stabil i to uker ved 2-8°C. Fortynningsbufferen inneholder 0,9 % fysiologisk saltvann.

Settet har en intern NEFA-standard. Dette tilsettes NEFA i en konsentrasjon som samsvarer med forventet konsentrasjon i prøven. Absorbansen til det blå-lilla pigmentet ved 546 nm måles for å beregne konsentrasjonen av NEFA i prøven.

Kolorimetrisk

Bruk av WAKO NEFA-settet har gitt en rekke resultater, inkludert noen som er useriøse. Likevel er NEFA-settet en verdig konkurrent når det gjelder å bestemme det relative fettsyreinnholdet i dyrevevsprøver. Som sådan er NEFA-settet en av de mer populære laboratorietester. Settet kommer med instruksjoner for testing av forskjellige typer prøver, inkludert blod, serum, spytt og en rekke lipider.

Den mest spennende delen av settet er at den kan brukes til å måle en rekke fettsyrer, inkludert de som ofte finnes i lipider. Settet kommer med en rekke enzymer designet for å oppdage en rekke fettsyrer, inkludert C-8 og C-16 fettsyrene som finnes hos mennesker og dyr. Ikke desto mindre anbefales ikke settet for bruk i høypresisjons FFA-konsentrasjoner over et bredt område.

Elektrokjemisk

NEFA er viktige fettsyrer for menneskers helse, men vurderes sjelden. I tillegg er deteksjonen deres veldig dyr. Derfor kan overvåking av endringer i konsentrasjonene hjelpe til med mer nøyaktig sykdomsforebygging og -behandling. I denne studien ble det utviklet et elektrokjemisk analysesett for NEFA, med PDA-MWCNT som sensoroverflate. Denne elektroden viste god elektrokatalytisk aktivitet for NEFA-oksidasjonstrinn, og kunne brukes i virkelige applikasjoner.

Enzymelektroden besto av en flerlags komposittfilm av PDA-MWCNT og ACOD, ACS og polymer. Rekkefølgen av lagene ble valgt for å matche den enzymatiske reaksjonsrekkefølgen. Det ble bestemt at ACS og ACOD forble biologisk aktive i filmen.

NEFA-konsentrasjon i T2D

NEFA-konsentrasjoner i blodet har blitt studert i sammenheng med fedme og hypertensjon. Disse forbindelsene har vist seg å fremme BP-økning gjennom a1-adrenerg stimulering og øke oksidant stress. NEFA er også assosiert med metabolsk syndrom. Disse forbindelsene kan være viktige i utviklingen av hypertensjon.

Flere modeller har blitt foreslått for å beskrive plasma NEFA-responsen på en intravenøs glukoseutfordring. Boston-modellen skildret nøyaktig den fjerde fasen av NEFA-konsentrasjonsøkningen. Modellen beskrev imidlertid ikke den innledende latensfasen. Fabian-modellen brukte en enkel eksponentiell helning for å beskrive denne fasen. På samme måte var ikke Thomaseth-modellen i stand til å beskrive rebound-fasen.

NEFA-nivåer i triglyserider

Flere studier har undersøkt effekten av fedmekirurgi på plasma NEFA-sammensetningen. I en meta-analyse publisert i 2016 ble serum-NEFA-nivåene redusert 6 og 12 måneder etter operasjonen. Dette kan ha vært på grunn av redusert insulinnivå. I en annen studie ble plasma-NEFA-er målt i en gruppe overvektige pasienter før og etter Roux-en-Y gastrisk bypass-operasjon.

Konsentrasjonen av syv NEFA-er ble redusert 9 måneder etter operasjonen. Linoleat (en omega-6-fettsyre) ble redusert med 18:2, stearat med 18:0 og oleat med 16:0. Konsentrasjonen av dokosaheksaenoat ble imidlertid ikke påvirket. NEFA ble omdannet til fettsyremetylestere (FAMEs). Disse ble deretter analysert ved gasskromatografi-massespektrometri (GC-MS).